眾所周知,目前已發現的RNA修飾存在超過100種,而最常見的修飾類型就是m6A(N6-腺苷酸甲基化)。(當然DNA中也存在m6A的修飾。)
【簡介】
甲基腺嘌呤(m6A)是目前發現的真核生物mRNA上含量最多的化學修飾,同時也廣泛存在于多種細菌和RNA病毒中。在動物或植物體內,m6A可以被一系列甲基轉移酶、去甲基酶和結合蛋白進行修飾、去修飾和識別。m6A可以通過影響RNA加工代謝從而調控多種生物學功能。例如在脊椎動物snRNAsU2、U4、U6中,在病毒和真核生物的mRNAs中,以及在大腸桿菌的16SrRNA中。最近的研究發現,mRNA主要是在終止密碼子和長的內部外顯子處進行m6A修飾,這在小鼠和人類之間是保守的。所謂的RNA甲基組可能在基因表達的調控中起著重要作用。在大腸桿菌中,Dam甲基酶在DNA水平上引入5'-GATC-3'的m6A修飾。這使得細胞在錯配修復過程中能夠區分親本鏈和子鏈。m6A甲基化的異常跟許多疾病,腫瘤,病毒感染均有關聯,其研究也因此備受矚目!
【m6A抗體應用】
研究靠得住,抗體第一步!目前檢測RNA的m6A修飾所采用的方法為m6A高通量檢測技術與基于抗體特異性檢測的技術。兩者的共同點在于,為避免細胞中大量rRNA與tRNA的干擾,必須將m6A修飾的RNA富集出來。而采取特異性抗體富集便是常用的方法,但是,目前所用的m6A抗體依舊存在靈敏度不強的缺陷,難以進行各類實驗;同時,在大量干擾RNA的存在下將m6A修飾的RNA進行富集非常困難。
【單克隆抗體優點】
1、特異性:單克隆抗體克隆單一純度高的抗體,特異性強,可單一控制病變;
2、多樣性:可以針對不同抗原做不同種的單克隆抗體,種類多;
3、定向性:結合力較單向,運用單克隆抗體定向運送到定向部位,控制病變。
【產品性能】
艾美捷貨號 | SYS-202-111 |
Cat. No. | 202 111 |
名稱 | n6 -甲基腺苷m6A 抗體 |
規格/抗體類型 | 100ug/單克隆抗體 |
應用類型 | Dot blot IP ELISA |
免疫原 | n6 -甲基腺苷與牛血清白蛋白融合 |
反應 | 人類,大鼠,小鼠,真核生物,原核生物 |
特異性 | 特異性n6-甲基腺苷(m6A)與m6Am有一定交叉反應 |
用m6A小鼠單克隆抗體(No.202 111)和兔多克隆抗體(No.202 003)檢測了含有m6A和對照寡核苷酸的數量。
A:不同m6A量的ELISA定量。小鼠抗m6a(克隆212B11)作為捕獲抗體,生物素化寡核苷酸作為抗原。低聚物由24個核苷酸組成,包括5個n6 -甲基-2-脫氧腺苷(m6A oligo BT)或脫氧腺苷(陰性對照oligo BT),并在其3'端生物素化。以鏈霉親和素偶聯HRP為檢測器。
B:釋放抗體結合的m6A。小鼠抗m6A(克隆212B11)被用作捕獲抗體,并被生物素化的m6A寡核苷酸飽和。加入不同數量的游離m6A (Sigma)與結合寡核苷酸競爭。以鏈霉親和素偶聯HRP為檢測器。
【相關產品】
多克隆抗體是來自同一物種的抗體分子的混合物,它們針對同一靶標,但可變靶標識別序列不同。單克隆抗體是共享恒定序列和可變序列的相同抗體分子。(m6A - 202 003、m6A - 202 011),這兩種抗體被諸多高分文章引用。
艾美捷貨號 | m6A - 202 003 | m6A - 202 011 |
Cat. No. | 202 003 | 202 011 |
名稱 | n6 -甲基腺苷m6A 抗體 | |
規格/抗體類型 | 50ug/多克隆抗體 | 100ug/單克隆抗體 |
應用類型 | DOTBLOT、IP、ELISA | WB、Dot Blot、IP |
免疫原 | n6 -甲基腺苷與牛血清白蛋白融合 | |
反應 | 人類,大鼠,小鼠,真核生物,原核生物 | |
特異性 | n6-甲基腺苷(m6A)與m6Am有一定交叉反應 |
【引文賞析】
【Dot blot】
N6-methyladenosine (m6A) RNA methylation mediated by methyltransferase complex subunit WTAP regulates amelogenesis.
Xie F, Zhu X, Liu X, Chen H, Wang J
The Journal of biological chemistry (2022) : 102715. 202 111 Dot blot
Enterotoxigenic Escherichia coli infection promotes enteric defensin expression via FOXO6-METTL3-m6A-GPR161 signalling axis.
Zong X, Wang H, Xiao X, Zhang Y, Hu Y, Wang F, Wang Y, Lu Z
RNA biology (2020) : 1-11. 202 111 Dot blot, IP; tested species: pig
Direct RNA sequencing enables m6A detection in endogenous transcript isoforms at base specific resolution.
Lorenz DA, Sathe S, Einstein JM, Yeo GW
RNA (New York, N.Y.) (2019) : . 202 111 Dot blot; tested species: human
Epitranscriptomic m6A Regulation of Axon Regeneration in the Adult Mammalian Nervous System.
Weng YL, Wang X, An R, Cassin J, Vissers C, Liu Y, Liu Y, Xu T, Wang X, Wong SZH, Joseph J, et al.
Neuron (2018) 972: 313-325.e6. 202 111 Dot blot; tested species: mouse
Transcriptional Dysregulation in Postnatal Glutamatergic Progenitors Contributes to Closure of the Cortical Neurogenic Period.
Donega V, Marcy G, Lo Giudice Q, Zweifel S, Angonin D, Fiorelli R, Abrous DN, Rival-Gervier S, Koehl M, Jabaudon D, Raineteau O, et al.
Cell reports (2018) 2210: 2567-2574. 202 111 Dot blot
【IP】
Identification and comparison of m6A modifications in glioblastoma non-coding RNAs with MeRIP-seq and Nanopore dRNA-seq.
Krusnauskas R, Stakaitis R, Steponaitis G, Almstrup K, Vaitkiene P
Epigenetics (2023) : 1-14. 202 111 IP; tested species: human
HBV/Pregenomic RNA Increases the Stemness and Promotes the Development of HBV-Related HCC Through Reciprocal Regulation With Insulin-Like Growth Factor 2 mRNA-Binding Protein 3.
Ding WB, Wang MC, Yu J, Huang G, Sun DP, Liu L, Zhang JN, Yang Y, Liu H, Zhou WP, Yang F, et al.
Hepatology (Baltimore, Md.) (2021) 743: 1480-1495. 202 111 IP; tested species: human
Localization of METTL16 at the Nuclear Periphery and the Nucleolus Is Cell Cycle-Specific and METTL16 Interacts with Several Nucleolar Proteins.
Stixová L, Kom?rková D, Svobodová Kova?íková A, Fagherazzi P, Bártová E
Life (Basel, Switzerland) (2021) 117: . 202 111 IP; tested species: mouse
Enterotoxigenic Escherichia coli infection promotes enteric defensin expression via FOXO6-METTL3-m6A-GPR161 signalling axis.
Zong X, Wang H, Xiao X, Zhang Y, Hu Y, Wang F, Wang Y, Lu Z
RNA biology (2020) : 1-11. 202 111 Dot blot, IP; tested species: pig
NOseq: amplicon sequencing evaluation method for RNA m6A sites after chemical deamination.
Werner S, Galliot A, Pichot F, Kemmer T, Marchand V, Sednev MV, Lence T, Roignant JY, K?nig J, H?bartner C, Motorin Y, et al.
Nucleic acids research (2020) : . 202 111 IP; tested species: human,drosophila
【IC】
N6-Adenosine Methylation in RNA and a Reduced m3G/TMG Level in Non-Coding RNAs Appear at Microirradiation-Induced DNA Lesions.
Svobodová Kova?íková A, Stixová L, Kova?ík A, Kom?rková D, Legartová S, Fagherazzi P, Bártová E
Cells (2020) 92: . 202 111 ICC; tested species: mouse
Synaptic Systems(SySy)品牌成立于德國,專注于研發和生產針對突觸和神經科學相關抗體,以及用于細胞生物學、組織病理學和高分辨率顯微鏡的各種抗體,除此之外,還推出與SySy抗體配套使用的試劑盒、試劑等產品組合,全方面滿足客戶的各種需求??贵w產品線主要有:突觸活性區域相關抗體、突觸后蛋白相關抗體、RNA修飾如m6A抗體、突觸粘附蛋白抗體、SNARE相關抗體、Alzheimer's相關抗體、細胞骨架、離子通道相關抗體等。 作為SySy在中國的區域總代理,艾美捷科技有限公司將為中國客戶提供最全面的SySy產品。
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